不同毒力松材线虫杂交后代的繁殖力和致病力的比较

为了解松材线虫致病力及繁殖力的遗传变异规律,以松材线虫强毒虫株及弱毒虫株为亲本进行杂交试验,并对杂交后代的繁殖力和致病力进行比较。结果表明:不同亲本间杂交成功率不同,同一对亲本的正交、反交成功率亦不同。大多数杂交后代群体在灰葡萄孢上和马尾松苗体内的繁殖力与亲本之间差异显著。杂交后代群体及强毒亲本接种马尾松5周后的致萎蔫率达90%~100%,而弱毒亲本接种的植株在10周后仅20%出现轻微的萎蔫症状。统计分析表明,松材线虫致病力与其在树体内的繁殖力间存在中等程度的正相关性,与灰葡萄孢上的繁殖力相关性较弱。聚类分析表明,不同毒力松材线虫杂交后代群体的致病力与繁殖力之间没有亲缘关系偏向,繁殖力与致病力不存在伴性遗传。     

两株松材线虫拮抗细菌的筛选和鉴定

【目的】筛选对松材线虫具有较高杀线活性的拮抗细菌。【方法】以分离自南京、洛阳、上海的松树茎部的137株内生细菌为研究对象,采用培养滤液和菌悬液浸渍法对这些菌株进行杀线活性的测定,并对筛选的高效拮抗细菌进行菌种鉴定。【结果】通过培养滤液浸渍试验筛选出3株细菌对松材线虫有较高的杀线活性,使用3种菌滤液处理线虫48 h后,线虫死亡率均达到100%,其中菌株LYMC-3的培养滤液还可使线虫虫体出现消解。将3株菌的培养滤液分别稀释2倍、4倍和10倍后处理松材线虫,随稀释倍数的增加,培养滤液的杀线活性逐渐降低。处理线虫48 h后,菌株LYMC-3的10倍稀释滤液与其他两株菌滤液相比对线虫的致死率最高,为94.7%; 在菌悬液浸渍试验中筛选出菌株NJSZ-13对松材线虫有较高杀线活性,10⁵ cfu/mL 浓度的菌悬液处理线虫48 h后,线虫死亡率达81.5%。通过对LYMC-3和NJSZ-13菌株的形态特征、生理生化特征、Biolog鉴定和16S rDNA序列以及系统发育分析,确定菌株LYMC-3、NJSZ-13分别为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。【结论】从松树体内筛选到两株对松材线虫有高效拮抗活性的菌株LYMC-3和NJSZ-13,对生物防治松材线虫病具有潜在的应用价值。     

黑松与松材线虫和拟松材线虫互作早期超氧自由基研究

为探讨黑松受不同毒力松材线虫与无毒拟松材线虫侵染后,超氧自由基(O2.-)在互作早期对松材线虫病发生发展的作用,采用2年生黑松接种强毒、弱毒松材线虫与无毒拟松材线虫,于接种后4、12、24、48、72、96、120 h对受侵染黑松的茎干和针叶取样测定。结果表明:黑松受不同毒力供试线虫侵染后体内O2.-和SOD活性变化差异显著。接种后12 h,松树茎、叶中的O2.-均出现第1次突增,茎部突增的强度与供试线虫毒力呈负相关,在针叶内O2.-出现第2次突增,且无毒拟松材线虫处理(48 h)的启动时间早于强毒松材线虫(72 h)的。SOD活性在接种无毒拟松材线虫的松树茎、叶中出现两次突增,而接种强毒松材线虫的处理仅出现1次突增。3种处理黑松茎、叶的Mn-SOD含量在24 h后第1次突增,且接种无毒拟松材线虫的高于接种强毒松材线虫的。O2.-与SOD的变化趋势在一定程度上呈正相关关系,但SOD的特异变化滞后于O2.-的变化。由此可见,超氧自由基可能是松树受松材线虫侵染后进行信号转导的重要桥梁物质。     

松材线虫携带细菌的致病性

用松材线虫携带的3种细菌（菌株Njh,菌株Njt和菌株Njw)和2种线虫（松材线虫和拟松材线虫）为接种体，以黑松愈伤组织和黑松无菌苗为接种对象，分别用无菌线虫单独接种，细菌单独接种，细菌和无菌松材线虫混合接种，细菌和无菌的拟松材线虫混合接种等，测定对黑松愈伤组织和黑松无菌苗的致病能力，接种试验结果表明，单独用无菌松材线虫或松松材线虫接种，均不能使黑松愈伤组织褐变和无菌黑松苗枯萎，而用无菌线虫与上述3种细菌分别混合接种均能使黑松无菌苗发生枯萎及愈伤组织严重褐变，其中线虫和菌株Njh，线虫和菌株Njt致萎活性很强，线虫和菌株Njw致萎活性较弱，在自然界致病力弱的拟松材线虫与细菌混合接种同样能引起松苗严重萎蔫及愈伤组织褐变，实验室条件下，人工接种幼苗病害的发生与松材线虫携带的细菌密切相关，而与线虫的在关系不大，松材线虫所携带的细菌在这一病害过程中起至关重要的作用。     

苯甲酸和苯乙酸对松材线虫及细菌活性的影响

在离体条件下，测定了苯甲酸(BA)和苯乙酸(PA)对马尾松(Pinus massoniana)水培枝叶、松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)及对分离自松材线虫虫体和健康马尾松的细菌菌株GD1和GD2的作用。结果显示，BA和PA对马尾松离体松叶、松枝均具有毒性，其中BA的毒性较强；一定浓度的BA能增强松材线虫的活力，低浓度BA和较高浓度PA均能促进松材线虫的繁殖，低浓度PA能促进菌株GD1的繁殖；高浓度BA和高浓度PA均能抑制松材线虫的活力，其中BA的抑制活性较强；高浓度BA能抑制松材线虫的繁殖，高浓度BA和较高浓度PA均能抑制菌株GD1的繁殖，而BA和PA对菌株GD2繁殖的抑制活性较对菌株GD1的强。     

基于GIS的中国松树萎蔫病发生的适应性评价

松材线虫在中国被认为是最具有破坏性和威胁性的外来入侵生物种之一.松材线虫潜在的区域扩散不论是从环境保护的角度还是从经济损失的角度都会对森林生态系统健康的服务功能和美学价值产生很大的影响.在中国存在很多的松材线虫容易感染的寄主植物,其中日本黑松和马尾松已经被证明是最容易感染的树种.媒介昆虫松墨天牛(Monochamus alternatus Hope),是松材线虫病在中国传播的主要媒介昆虫.这种天牛主要分布在河北及河北南部的大部分省份,其大范围存在使松材线虫病在中国更大区域的传播和扩散成为可能.中国大部分地区的温度和积温都适合松树萎蔫病病原线虫和媒介昆虫的大面积发生.利用GIS对传媒昆虫、寄主树木、病原线虫以及气候等空间信息处理和分析,得出松材线虫病在中国有着极大扩散和传播可能,其中广东部分地区、广西和福建部分地区为松树萎蔫病理论上发生最为严重的区域;安徽、江苏、浙江、上海、湖南、湖北、贵州、四川、河南和山东部分地区为松树萎蔫病理论上发生的适宜区.科学的预防和严格的地区间检疫等措施对目前防止松材线虫更大范围内传播很有必要.     

松褐天牛传递松材线虫数量的研究

松褐天牛从取食开始到试验结束（50d），将松材线虫通过补充营养伤口传递到健康松树，取食到20d时传递的数量最多，每头694条，到第30天数量较多，在此之前和之后数量较少，每头100条左右。松褐天牛将60％的松材线虫传递到当年生树树，随着树枝年龄增加，传递数量减少。实验室和林间试验分离分离测计表明，松褐天牛的身体仍残留一定数量的松材线虫。     

湖北恩施松材线虫病的防治现状及对策

湖北恩施市自1999年城区及周围发现松材线虫病以来，累计发病面积已达600多hm^2。从2000年春起，经过2年除治，取得较好的结果，但也存在一定的问题。本文对恩施松材线虫病的分布情况。防治现状及存在问题进行了阐述和分析，并提出了下一步应采取的对策。     

土壤真菌培养物对松材线虫生长和繁殖抑制作用的研究

从土壤分离的９９株真菌以ＰＳＭ培养基培养，检测其培养物对松材线虫生长和繁殖的抑制作用，结果发现１８号菌株显示了极强的抗线虫活性，经初步分析其活性成分为水溶性的中性物质。     

不同龄级马尾松对松材线虫病抗性的探讨

从松褐天牛（Ｍｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓ）成虫活体上分离用ＰＤＡ平板灰葡萄孢（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）培养的松村线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）对不同龄级和不同生长势的马尾松（Ｐｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａ）的接种试验表明，１４年生以下和生长势旺盛的马尾松幼树抗松材线虫病；１６年生以上和长势弱的马尾松中龄、成熟和过熟林树对松材线虫病的抗性较弱，并随树龄的增加和长势的减弱抗病能力减弱。对各龄级马尾松的化学内含物萜类和树脂酸的组成分析，长叶烯、α－烯和去氢枞酸的含量随树龄的增加而增加，并与其抗性呈负相关；β－蒎烯、单萜和枞酸型树脂酸的含量随树龄的增加而减少，并与其抗性呈正相关。有相关性的化学内含物加入ＰＤＡ灰葡萄孢平板培养基培养松材线虫，与接种试验有相同趋势，长叶烯和去氢枞酸加入量的增大有利于线虫繁殖；β－蒎烯、单萜和枞酸型树脂酸则相反，加入量增大（与树内量相近）线虫的繁殖量减少，说明含量高时对线虫的生存和繁殖有抑制作用。